實驗室離心機分離方法不一
發布時間:2016-11-24 16:23:35??????點擊:
實驗室離心機顧名思義就是專業用于實驗分析的小型離心機,比如做兩種不同分子量的蛋白質混合液的分離,利用這兩種蛋白質的質量不同的原理,調到一定的轉速,離心一段時間后,就可以將這兩種蛋白質分開了。它按用途可分為工業用實驗室離心機和醫用實驗室離心機。工業用實驗室離心機通常用于工業固液的分離試驗、物料性能分析、少量分離工藝、企業實驗室等。而醫用實驗室離心機主要用于醫療實驗、醫院、制藥企業、生物研究所、精細化工等。
實驗室離心機分離方法不一,適用場合也不盡相同。目前最主流的離心分離方法主要是差速離心法和區帶離心法,其實在實驗室離心技術制備超離心法一文中有提及兩種離心方法,今天小編對這兩種方法的原理及應用介紹進行補充和完善。
1. 差速離心法:許多具有生物活性的生物大分子和亞細胞器是不穩定的,需要低溫高速離心,最常用的是差速離心法。通過離心后倒出上清液和沉淀分開,把分離出來的上清液再增大轉速離心,分離出第二部分沉淀,這樣不斷增大轉速,逐級分離出所需要的物質。利用這種方法可以有效地分離大小上差別較大的顆粒,但不能分離大小相似的顆粒,而且所分離出來的組分往往是不均一的,雜有其他種類的顆粒。
2.區帶離心法:其中又可以分為兩種:速率區帶離心和等密度速率區帶離心。
1) 速率區帶離心法:這是將小量懸液放在一平緩的密度梯度液上,用此梯度液來穩定顆粒的沉降。由于離心,顆粒離開起始區帶而移動,移動的速度是由顆粒的大小、形狀和它們所受實驗室離心機的離心力來決定的。離心一段時間歷,各種穎粒將按照它們的相對速度移動而各個分開,成為一系列區帶。用這種方法我們可以將沉降速度差為20%或者更大的顆粒。
2)等密度區帶離心法:這是將要分離的顆粒懸液放至密度梯度液上,或者實際上將顆粒溶于制作梯度的溶液中。通過離心,顆?;蛘呱细』蛘呦鲁?,達到與它們自己密度相同的液體處在這里它們沒有重量,不管離心多長時間,它們再也不移動了。這些顆??沙蔀橐幌盗袇^帶,每種顆粒在它自己的密度區。所以,這是一種利用顆粒浮密度的大小分離顆粒大小的方法。使用的介質通常是氯化銫(Cscl)和硫酸銫(Cs2SO4)。前者適合于DNA分離,后者適合于RNA分離。這種方法與速率區帶離心法相比,它有一個主要的缺點是在離心期間,顆粒不可避免地暴露在高濃度的梯度溶液中,會引起顆粒的部分損傷,并可能出現相當于損傷顆粒的一些額外的區帶。
實驗室離心機從名字我們就可以知道,它是專用于實驗室的一種設備,是利用離心力對混合溶液進行快速分離的專門設備,如:生物細胞、蛋白等有機物、無機物溶液及膠體等樣品進行分離、濃縮、提取。
實驗室離心機分離方法不一,適用場合也不盡相同。目前最主流的離心分離方法主要是差速離心法和區帶離心法,其實在實驗室離心技術制備超離心法一文中有提及兩種離心方法,今天小編對這兩種方法的原理及應用介紹進行補充和完善。
1. 差速離心法:許多具有生物活性的生物大分子和亞細胞器是不穩定的,需要低溫高速離心,最常用的是差速離心法。通過離心后倒出上清液和沉淀分開,把分離出來的上清液再增大轉速離心,分離出第二部分沉淀,這樣不斷增大轉速,逐級分離出所需要的物質。利用這種方法可以有效地分離大小上差別較大的顆粒,但不能分離大小相似的顆粒,而且所分離出來的組分往往是不均一的,雜有其他種類的顆粒。
2.區帶離心法:其中又可以分為兩種:速率區帶離心和等密度速率區帶離心。
1) 速率區帶離心法:這是將小量懸液放在一平緩的密度梯度液上,用此梯度液來穩定顆粒的沉降。由于離心,顆粒離開起始區帶而移動,移動的速度是由顆粒的大小、形狀和它們所受實驗室離心機的離心力來決定的。離心一段時間歷,各種穎粒將按照它們的相對速度移動而各個分開,成為一系列區帶。用這種方法我們可以將沉降速度差為20%或者更大的顆粒。
2)等密度區帶離心法:這是將要分離的顆粒懸液放至密度梯度液上,或者實際上將顆粒溶于制作梯度的溶液中。通過離心,顆?;蛘呱细』蛘呦鲁?,達到與它們自己密度相同的液體處在這里它們沒有重量,不管離心多長時間,它們再也不移動了。這些顆??沙蔀橐幌盗袇^帶,每種顆粒在它自己的密度區。所以,這是一種利用顆粒浮密度的大小分離顆粒大小的方法。使用的介質通常是氯化銫(Cscl)和硫酸銫(Cs2SO4)。前者適合于DNA分離,后者適合于RNA分離。這種方法與速率區帶離心法相比,它有一個主要的缺點是在離心期間,顆粒不可避免地暴露在高濃度的梯度溶液中,會引起顆粒的部分損傷,并可能出現相當于損傷顆粒的一些額外的區帶。
實驗室離心機從名字我們就可以知道,它是專用于實驗室的一種設備,是利用離心力對混合溶液進行快速分離的專門設備,如:生物細胞、蛋白等有機物、無機物溶液及膠體等樣品進行分離、濃縮、提取。
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